核酸凝膠染料應該如何進行選擇？

SPEED Biosystems 擁有一系列核酸凝膠染料，包括用于凝膠前和凝膠后染色的 GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™，以及用于電泳前與核酸混合的 SafeGreen™ 和 SafeRed™ 上樣染料。這些染料是下一代熒光核酸凝膠染料，旨在替代高致突變性溴化乙錠 （EB）。這些染料兼具高靈敏度、低毒性和高穩定性，優于 EB。EB 因其成本低且通常具有足夠的靈敏度而被廣泛用于核酸凝膠染色。然而，EB 具有高度誘變性。與凈化和廢物處理相關的安全隱患和成本最終會使染料變得昂貴且使用不便。

用于凝膠前和凝膠后染色的凝膠染料（GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™）

優勢

★ 比 EB 更安全。Ames 試驗和其他試驗顯示無突變性和無細胞毒性。

★ 常溫下穩定。

★ 與標準藍光 LED 和 UV 透射儀兼容。

★ 與藍光一起使用可減少凝膠切除和后續克隆的誘變。

圖 1.使用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的凝膠染色結果（左圖），以及使用 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 的比較結果（右圖）。左圖：將 1 kb DNA 分子量標準（NEB，貨號 # N0468S）的兩倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（從左到右）的量分分 3 個泳道上加載到每塊凝膠上，然后用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 進行后染色。右圖：結果顯示 GreenView™ 與 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 具有相似的靈敏度，GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的靈敏度要好得多。

圖 2.使用 RedView™ 和 GelRed™ 進行凝膠染色結果。將 1 kb DNA 分子量標準品的 2 倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（從左到右）的量分裝到 3 個泳道的每塊凝膠上，然后分別用 RedView™ 和 GelRed™ 進行后染色。結果顯示 RedView™ 與 GelRed™ 具有相似的靈敏度。

除了比 EB 更安全之外，與 SYBR Safe DNA 凝膠染料相比，GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 的細胞通透性降低，使其更安全（圖 3）。

圖 3.使用 SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 進行細胞通透性測試。Hela 細胞在 37？使用 1X SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 30 分鐘。

GreenView Plus 和 RedView 無法穿透細胞膜以結合活細胞中的 DNA，并且比 SYBR Safe 安全得多，后者可快速進入細胞并對細胞核進行染色。

如何選擇適合您的 DNA 染色劑？

凝膠上樣染料（SafeGreen™ 和 SafeRed™）

優勢

★ 在 6X 上樣緩沖液中配制，即用型。

★ 安全無毒，是 EB 的替代品。

圖 4.使用 SafeGreen™（左圖）和 SafeRed™（右）與 DNA 分子量標準預混合的凝膠染色結果。

SafeGreen™ 和 SafeRed™ 經過專門設計，不滲透細胞膜，從而通過防止染料進入活細胞來降低遺傳毒性（圖 5）

圖 5.使用 SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 進行細胞通透性檢測。將 Hela 細胞在 37oC 下與 1X SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 一起孵育 30 分鐘。SafeGreen™ 和 SafeRed™ 無法穿透細胞膜結合活細胞中的 DNA，比 SYBR Safe™ 安全得多，后者可快速進入細胞并對細胞核進行染色。

相關產品

GreenView™ DNA Gel Stain   貨號 LYF1001

GreenView™ Plus DNA Gel Stain 貨號 LYF1002

GreenView™ Ultra DNA Gel Stain 貨號 LYF1003

RedView™ DNA Gel Stain  貨號 LYF1004

SafeGreen™ Loading Dye  貨號 LYF1005

SafeRed™ Loading Dye  貨號 LYF1006