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            葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒

            簡要描述:葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒 葡萄糖-6-磷酸( Glucose 6-phosphate, 6P G)含量測定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業實驗室產品.為客戶全面解決實驗、生產、開發需求,提供方便、快捷的服務。

            • 產品型號:
            • 廠商性質:代理商
            • 更新時間:2024-05-08
            • 訪  問  量:296

            詳細介紹

            品牌其他品牌供貨周期現貨
            應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,制藥

            葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒

            微量法 100管/48樣

            正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

            測定意義:

             6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉化形成糖原或淀粉而被儲存起來。

             

            測定原理:

            6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測定吸光值。

             

            需自備的儀器和用品:

            酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

             

            試劑的組成和配制:

            提取液:液體60 mL×1瓶,4℃保存;

            試劑一:液體12mL×1瓶, 4℃保存;

            試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;

            試劑三:液體1.5mL×1管, 4℃避光保存。

            6PG提?。?/p>

            1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次), 8000g,25℃離心10min,取上清待測。

            2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿,8000g,25℃離心10min,取上清待測。

            3、血清(漿)等液體樣品:直接測定。

             

            測定步驟:

            1、酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

            2、試劑二的配制:臨用前加入3mL水充分溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存;

            3、工作液的配制:臨用前按照樣本數量,按以下比例配制工作液

            試劑名稱(μL)

            測定工作液

            對照工作液

            試劑一

            100

            100

            試劑二

            50



            50

            試劑三

            10

            10

            1. 樣本測定

            按下表在96孔板中加入如下試劑

            試劑名稱(μL)

            測定管

            對照管

            樣本

            50

            50

            測定工作液

            150


            對照工作液 


            150

            37℃避光孵育30min,450nm下測定吸光值A測定與A對照,△A=A測定-A對照。每個測定管需設一個對照管。

             

            6PG含量計算:

            1、標準條件下測定回歸方程為y = 3.8589x - 0.0016,R2 = 0.997; x為6PG含量(μmol/mL),y為吸光值。

            2、按照血清(漿)體積計算

            6PG含量(nmol/mL)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷V1×1000

            =259.1×(△A+0.0016)

            3、按照蛋白濃度計算

            6PG含量(nmol/mg prot)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(V1×Cpr)×1000

            =259.1×(△A+0.0016) ÷Cpr

            4、按照樣品質量計算

            6PG含量(nmol/g鮮重)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(W ×V1÷V2)×1000

            =259.1×(△A+0.0016) ÷W

            3、按照細菌或細胞密度計算

            6PG含量(nmol/104 cell)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(500×V1÷V2)×1000

            =0.518×(△A+0.0016)

            V1:加入反應體系中樣本體積,0.05mL;V2:加入提取液體積,1 mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬;1000,μmol到nmol的換算系數。


            上海牧榮生物科技有限公司

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            葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒





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