蔗糖合成酶（分解方向 SSⅠ)測試盒

蔗糖合成酶（分解方向 SSⅠ)測試盒

 微量法 100管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義

蔗糖是源（葉片等）光合產物向“庫"器官運輸的主要形態。蔗糖合成酶（Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13）是雙向反應酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代謝的關鍵酶之一。研究其分解方向SS-Ⅰ的活性對于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意義。

測定原理

SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游離果糖和UDPG，采用3,5－二硝基水楊酸法測定還原糖的含量來反映酶活性的高低。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰

試劑的組成和配制

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存；

試劑二： 液體5mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×2支，-20℃保存；臨用前每支加入1.2mL試劑二充分溶解待用，現配現用；

試劑四：液體6mL×1瓶，4℃保存。

樣品測定的準備： 

按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟

1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至540nm，蒸餾水調零。

2. 樣本測定，（在EP管中依次加入下列試劑）：

混勻，30℃準確水浴30min后，95℃水浴10min

95℃水浴5min左右，冷卻至室溫

混勻，取200μL 至微量石英比色皿或96孔板中，540nm下測定各管

吸光值。ΔA=A測定-A對照。每個測定管需要設一個對照管。

SS-Ⅰ活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.0012x - 0.0492；x為標準品濃度（μg/mL），y為ΔA。

2、按照蛋白濃度計算

單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)= (ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T

=138.9×(ΔA+0.0492) ÷Cpr

3、按照樣本鮮重計算

單位定義：每g組織每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/g鮮重) =(ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T

=138.9×(ΔA+0.0492) ÷W

V反總：反應體系總體積，0.05mL； V樣：加入樣本體積，0.01 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。

b.用96孔板測定的計算公式如下

1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.0006x - 0.0492；x為標準品濃度（μg/mL），y為ΔA。

2、按照蛋白濃度計算

單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)= (ΔA+0.0492) ÷0.0006×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T

=277.8×(ΔA+0.0492) ÷Cpr

3、按照樣本鮮重計算

單位定義：每g組織每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/g鮮重) =(ΔA+0.0492) ÷0.0006×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T

=277.8×(ΔA+0.0492) ÷W

V反總：反應體系總體積，0.05mL； V樣：加入樣本體積，0.01 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國內試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購?？商峁W美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源，加強網絡建設，提高公司內部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優惠的價格。

蔗糖合成酶（分解方向 SSⅠ)測試盒