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            蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒

            簡要描述:蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒 蔗糖磷酸合成酶(Sucrose phosphate synthase,SPS)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業實驗室產品.為客戶全面解決實驗、生產、開發需求,提供方便、快捷的服務。

            • 產品型號:
            • 廠商性質:代理商
            • 更新時間:2024-05-08
            • 訪  問  量:255

            詳細介紹

            品牌其他品牌供貨周期現貨
            應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,制藥

            蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒 

            微量法 100管/48樣

            正式測定管前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

            測定意義

            蔗糖不僅是重要的光合產物,也是植物體內運輸的主要物質,還是碳水化合物的貯存形式之一。SPS(EC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸為受體,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統看作是蔗糖合成的主要途徑。

            測定原理

            蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸與間苯二酚反應可呈現顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。

            需自備的的儀器和用品

            可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰

            試劑的組成和配制

            提取液液體100mL×1瓶,4℃保存;

            試劑一:液體2.5mL×1瓶,-20℃保存;

            試劑二:1000μg/mL蔗糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;

            試劑三:液體2mL×1瓶,4℃保存

            試劑四:液體25mL×1瓶,4℃保存;

            試劑五:液體6mL×1瓶,4℃避光保存;

            樣品測定的準備: 

            按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

            測定步驟

            1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至480nm,蒸餾水調零。

            2. 樣本測定,(在EP管中依次加入下列試劑):

            試劑名稱(μL)

            測定管

            對照管

            標準管

            空白管

            樣本

            10

            10



            蒸餾水


            45

            45

            55

            試劑二



            10


            試劑一

            45




            混勻,25℃準確水浴10min

             試劑三

            15

            15

            15

            15

            沸水浴中煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分散失),冷卻

            試劑四

                 210

                 210

            210

            210

            試劑五

                 60

                  60

            60

            60

            混勻,沸水浴30min,冷卻后,取200μL 至微量石英比色皿或96孔板中,480nm下測定各管吸光值。標準管和空白管只要做一管。每個測定管需要設一個對照管。

            SPS活力單位的計算

            1、按照蛋白濃度計算

            單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

            SPS活性(μg /min/mg prot)= C標準管×V1×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

            2、按照樣本鮮重計算

            單位定義:每g組織每分鐘催化產生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

            SPS活性(μg /min/g鮮重) = C標準管×V1×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷W

            C標準管:標準管濃度,1000μg/mL;V1:加入反應體系中樣本體積,0.01mL; V2:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;T :反應時間:10min。


            上海牧榮生物科技有限公司

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            蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒 

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