| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | PP-235 |
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| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥 |
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jenabioscience:病毒RNA+DNA制備試劑盒-柱試劑盒Viral RNA+DNA Preparation Kit - Column Kit ——從血液、血清、組織、細胞培養物或拭子中基于旋轉柱的RNA+DNA純化
Jena Bioscience由Max-Planck-Institute of Molecular Physiology(Dortmund)的一組科學家于1998年成立，利用超過25年的學術知識為100多個國家的研究和行業客戶開發創新試劑。
供一般實驗室使用。
運輸:在環境溫度下裝運
儲存條件:在環境溫度下儲存
保質期:12個月
描述:
病毒RNA+DNA制備試劑盒設計用于從各種病原體生物(如病毒或細菌)中快速有效地分離RNA和DNA。樣品可以是新鮮的或冷凍的血漿/血液(用除肝素以外的抗凝血劑處理)、血清、其他無細胞體液或病原體感染的組織。該試劑盒允許從鼻腔或咽喉拭子中高產量分離病毒RNA/DNA。
該試劑盒專門設計用于使用低洗脫體積分離高質量核酸，并允許靈敏的下游分析，包括定量PCR和RT-PCR。純化的RNA/DNA不含蛋白質和核酸酶。病毒RNA+DNA制備試劑盒使用包含離液鹽的裂解緩沖液來滅活RNA酶/DNA酶，并使用優良的硅膠膜技術來快速純化完整的RNA/DNA。制備程序經過優化，可在30分鐘內獲得可靠的結果。
內容:
| 成分 | PP-235S
50準備套件 | PP-235L
5 x 50預備套件 |
| 裂解緩沖液 | 15毫升 | 75毫升 |
| 乙醇(96-99 %) | 加入15毫升乙醇 | 加入75毫升乙醇 |
| 洗滌緩沖液A | 15毫升(使用前加入15毫升乙醇) | 75毫升(使用前加入75毫升乙醇) |
| 洗滌緩沖液B | 6.2毫升(使用前加入25毫升乙醇) | 31毫升(使用前加入125毫升乙醇) |
| 洗脫緩沖液 | 3毫升 | 15毫升 |
| 旋轉柱和收集管 | 50個旋轉柱和收集管 | 5 x 50旋轉柱和收集管 |
所需的附加材料:
96-99 %乙醇
1.5毫升試管
準備程序:
DNA純化遵循細胞裂解、RNA/DNA結合、洗滌和洗脫程序。開始前，按照數據表和瓶子上的指示，向清洗緩沖液A和B中添加乙醇(96-99 %，不包括在試劑盒中)。請注意，洗滌緩沖液的乙醇濃度在長期儲存過程中可能會降低，導致最終DNA產量下降。
所提供的裂解緩沖液包含載體分子以增強RNA/DNA在柱膜上的結合。
1a從鼻腔或咽喉拭子制備
- 轉移250微升
裂解緩沖液
放進微量離心管。 - 切下帶有收集的鼻或喉細胞的棉尖，并將其置于微量管中。
- 關閉試管并渦旋15秒。
- 在室溫(20-25°C)下孵育10分鐘。
- 取下棉簽，在試管邊緣將其擠出。
- 添加250微升
乙醇(96-99 %)
并通過輕輕渦旋充分混合。
1b從血漿、血清、尿液、細胞培養上清液、無細胞液體或病毒感染組織中制備
- 將100 μl血漿、血清、尿液、細胞培養上清液、無細胞液體或病毒感染組織轉移到1.5 ml微管中。
- 注意:較大體積(高達200 μl)的樣品可以很容易地放大，但可能需要更大的試管用于裂解程序。
- 添加250微升(或2.5倍樣品體積)的
裂解緩沖液.
- 渦旋15秒。
- 在室溫(20-25°C)下孵育10分鐘。
- 添加250微升(或2.5倍的樣品體積)
乙醇(96-99 %)
并通過輕輕渦旋充分混合。
2列裝載
- 放置a
旋轉柱
放入提供的2 ml收集管中。 - 旋轉溶解產物-乙醇混合物，并將溶液轉移到
旋轉柱.
- 蓋上蓋子，離心
旋轉柱
轉速為13，000轉/分鐘，持續1分鐘。 - 丟棄收集管中的流通液，并將色譜柱放回同一管中。
- 注意:色譜柱儲器的最大容量為800 μl。對于更大的樣品容量，丟棄中間的流通液并再次裝載旋轉色譜柱。
3柱清洗
- 添加500微升
洗滌緩沖液A(加入乙醇)
到旋轉柱
并在13,000 rpm下離心1分鐘。 - 丟棄收集管中的流通液，并將旋轉柱放回同一管中。
- 添加500微升
洗滌緩沖液B(添加乙醇)
并以13，000 rpm離心1分鐘。 - 注意:在第一次使用清洗緩沖液B之前，按照瓶子上的指示添加乙醇。
- 丟棄收集管中的流通液，并將旋轉柱放回同一管中。
- 以13，000 rpm的速度離心1分鐘。
- 注意:干燥膜很重要，因為殘留的乙醇可能會干擾下游反應。
4洗脫
- 放置
旋轉柱
放入新的1.5毫升微量試管(未提供)。 - 添加40-50微升
洗脫緩沖液
直接到旋轉柱的膜上。 - 注意:避免用移液管頭端接觸薄膜。
- 室溫下孵育1分鐘。
- 以13，000 rpm的速度離心1分鐘。
- 使用2-5 μl洗脫的RNA和/或DNA作為PCR或RT-PCR檢測或進一步下游應用的模板。洗脫的RNA/DNA可以儲存在-70℃下
上海牧榮生物科技有限公司
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